稀释涂布平板法的具体步骤

分类:步骤流程网浏览量:866发布于:2021-06-03 06:38:56

稀释涂布平板法的具体步骤

稀释操作:1、将分别盛有9ml水的6支试管灭菌,并按10^1到10^6的顺序进行编号.2、用移液试管吸取1ml培养的菌夜,注入10^1倍稀释的试管中.用手指轻压移夜管上的

因为一般细菌浓度比较高,但是我们又很难把控这个浓度,所以就每个梯度都稀释出来,然后去涂板子,这样就可以保证有一个板子上的细菌长的菌落数目比较合适,同时再看下该浓度上下一个梯度是不是差不多是十倍关系,如果不是就说明你稀释的不够好,测量数据不够准确~

平板法分离培养的原理就是,平板上的一个单菌落都是由初始的一个微生物繁殖产生的,也就是说,一个单菌落里的所有微生物都是相同的.这样,在划线或稀释涂平板后挑取单菌落,那么就获得了一个纯的微生物群体.明白否? 划线通过一系列交替或者连续的划线,将接种针上的菌再培养基上划开,这样可以保证有单独的菌来生长出一个单菌落.单菌落你都不会挑么?板上长出单菌落后挑取到培养液中培养,获得的就是纯的一个系的微生物了.还不明白?

稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面,进行培养.在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个菌落.

1.样品稀释液的制备 准确称取待测样品l0g,放入装有90ml无菌水并放有小玻璃珠的250ml三角瓶中,用手或置摇床上振荡20min,使微生物细胞分散,静置20-30s,即成10

每克样品中的菌株数=(C÷V)*M C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数.很好理解啊,稀释涂布就是为了让一个菌株生长成一个群落,培养出来的群落数就代表了涂布平板用的稀释液体积中的菌株数,再乘以稀释倍数,就能得到样品中菌株数了啊

如果只有一个稀释度的平均菌落数符合30~300这个范围 则以该稀释度平均菌落数除以涂布平板所用稀释液体积(0.1mL),乘以稀释倍数作为该样品的细菌总数 如果有两个稀释度的平均菌落数符合要求 则按照两者菌落总数之比来决定 如果小于2,取两者的平均值 如果大于2,取较小的菌落总数 本题的46*10^3与295*10^2的比之为1.6 应取两者的平均值 (46*10^3+295*10^2)/0.1/2=3.775*10^5

另外还可以通过相近浓度的菌落数量是否成10倍的关系来检验梯度稀释是否均匀,一方面可以使实验更加严谨.只要你能从平板中挑到单菌落如果是用来计数的话.当然如果仅是要纯化的话,就可以直接挑选一个合适的浓度来涂布就可以,就要一个浓度一个浓度来涂

1. 平板划线分离法 由接种bai环以菌操作沾取少许待分离的材料,在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线,微生物细胞数量将随着划线次数的增加

⑴将若干无菌培养皿叠放在左侧,便于拿取.⑵点燃煤气灯,将火焰调到适中(空气不要太大,以免气流过急).⑶倒平板时,先用左手握住锥形瓶的底部,倾斜锥形瓶,